负染色法

负染色法(Negative stain)是一种染色方法，常用于不透光液体标本来自的镜检。由于其染色处理过程并非针对菌体本身，故又称"衬托染色法"、"间接染色法"。在负染色法中，标本不需要间法合起频大青之热固定，细胞不会因为化学药物的影响而变形，对于不易染色的细菌或病毒也能观察。

• 中文名 负染色法
• 外文名 Negative stain
• 其他名称 衬托染色法，间接染色法
• 用途 不透光液体标本的镜检
• 解像力 0.5微米以下

负染色来自法

　　负染色法(negative staining)染色处理过程主要并非针对菌体本身，故又称"衬托染色法"。是一种易于在电子显微镜下观察试样的微细结构的方法。它是用磷360百科钨酸钠、醋酸氧铀等电子密度高的物质，嵌入生物试样的间隙，根据产生的对比进行观察，而非原来意义上的物质染色。它与通常在电子显球守干革同以密微镜中所得的阳面物像不同，而是阴面物像，因而有此名称。解像力可达0.5微米以下。

以进负染色法

　　最早由S.Brenner和R.Horne，(195异激肉情千部刻常死相9)用于病毒粒子的观察，以后利剧多用此法很快地积累了病毒、细菌以及分层蛋写真啊情也列所指钱执府白质的微细结构等方面的知识。

　　负染色法需要使用酸给球杂灯挥阿短未架村性染料来染色，如伊红或苯胺黑。因为细菌体表面带负电，而酸性染料的色原也带负电，所以色原只能将背景染色。没有染色的细胞在染色背景下就能很容易的观察到。地家检名著增雨在负染色法中，标本不需要热固定，细胞不会因为化学药物的影响而变形地拿某祖车承言课财，对于不易染色的细菌或病毒也能观察。

　　负染色法 此种染色法之染色处理过程主满转富算音副革商弱要并非针对菌体本身，故又称「间接染色法」。 所用之染剂系因阴离子呈色却点杨娘，所以无法对同样带阴电荷之菌体细胞呈色，而于染色处理时会在细胞周围形成沉淀，这种情形即称为会审然快讲阴性或间接染色。又称背景染色法

染色剂

　　就透射电子显微镜来说，原子所带电子减料者岁写丰答笑宪伟班的不透明度与其原子序数有关，也就是和核外电子数有关。所以应选择有较强的电子散射能力且易被生物吸附的试剂构普识海完文作为负染色剂，一些常用的负染色剂有钼酸铵、乙酸铀酰、甲酸铀酰散排投板看声死温注食(英语:Uranyl formate)、磷钨酸、四氧化锇、锇铁氰化钾等[2]。使用负染色法可以看到普通光学显微镜下无法看清的结构。该方法主要用于观察病毒、细菌、细菌鞭毛、生物膜等结构，这些结构的电子散射能基祖苦司进快由曲充力均较低[3]。

操作方法

材料

　　试剂:苯胺黑染色液 或 伊红染色液 等酸性染料

　　器材:酒精灯(或本生灯)、接种环、染色盘、玻片、拭镜纸及显微镜。

步骤

　　①取一小滴苯胺黑染色液，滴于洁净玻片之一端。

　　②以无菌操作取一接种环之培养，置入苯胺黑染色液中，混匀。

　　③取另一玻片(或盖玻片)其一端置于苯胺黑色液之前，并呈 30 度状态，向他端推去，使混和液成一薄涂膜。

　　来自④将玻片置空气中干燥，不宜以热固定。

　　⑤校统以油镜观察之。