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伴刀豆凝集素A
伴刀豆凝集素A（Concanavalin A，缩写ConA）是一种糖类结合蛋白质，又叫刀豆球蛋白A、伴刀豆球蛋白、刀豆素，是一种植物血凝素( Phytohemagglutin)，其本质是一类多价的、非免疫来源的、对糖及其缀合物高度专一识别的蛋白质。它在植物体内的作用是促进种子的成熟和发芽，储存蛋白质，转移糖，防御病原微生物，促进细胞生成等。它通过各种机制对动物产生抗营养作用，为刀豆种子中的抗营养因子。在刀豆种子中，ConA 的含量较为丰富，占总蛋白的1% ～3%。
基本介绍
- 中文名：伴刀豆凝集素A
- 外文名：Concanavalin A
- 来源：刀豆
- 性质：四聚体球蛋白
- 英文简称：ConA
- 作用：血凝素
结构性质
它是四聚体球蛋白，分子量102,000。每个亚基含237个胺基酸残基，分子量25,500，结合一个Ca2+和一个Mn2+，含一个糖结合部位。能与α-甘露糖、α-葡萄糖(细胞膜糖蛋白上)专一地结合，结合位点要求是α-D-吡喃甘露糖或α-D吡喃葡萄糖六元环中的C-3/C-4和C-6未被取代羟基，与以α-1，2糖苷键连线的甘露二糖和甘露三糖有最大的亲和力。
功能特徵
血型特异性：对唾液酸苷酶处理的红细胞无特异性。
凝集活性：对唾液酸苷酶处理的红细胞产生肉眼可见的凝集需0.5～10μg/ml。
糖抑制：α-甲基-甘露糖苷>α-D-甘露糖>α-D葡萄糖>α-N-乙醯葡萄糖胺
提取分离方法
以新鲜刀豆种子为原料，提取刀豆中凝集素的最佳溶剂是甲酸溶液，凝集素提取的最优工艺条件为：提取温度为22℃、提取时间为2.5h、甲酸溶液中NaCl 浓度为0.20mol/L、甲酸浓度为0.7mol/L、料液比为1:50(W/V)。提取所得刀豆凝集素活力为102.96HU/g、蛋白质提取量为11.15mg/g。凝集素提取液经硫酸铵分级沉澱、透析等处理后得到刀豆凝集素(SJL)粗品。经HPLC 分析表明，刀豆凝集初步分离产物的组分较为複杂，有多种不同分子量的蛋白质构成，分子量分布範围较广，从150000D到1300D左右。分子量为71000D左右的组分占22.65%，分子量为36000D左右的组分占15.55%。这说明初步分离产物中刀豆凝集素的含量较高。
套用方向
Con A具有广阔的适用性，是一种重要的生化和免疫研究试剂。
Con A能沉澱多种糖类，葡聚糖和果聚糖等很多其它多糖，以及免疫球蛋白和血型物质等多种糖蛋白，还沉澱肺炎球菌多糖，并能凝集多种红细胞。Con A能和很多细菌和动物细胞反应，能区分某些正常和肿瘤细胞，能促进细胞分裂（促有丝分裂作用）。Con A被用来刺激T细胞产生IL 1样因子，还用于脾细胞增生，研究激活所必需的配体/受体作用。利用免疫组化技术，Con A可用于病理标本中的组织细胞的巨噬细胞展示，区分正常分泌ACTH的垂体细胞和分泌ACTH的腺肿瘤细胞。Con A加强谷氨酸盐神经递质受体的反应，已被用于研究糖基化在离子通道调节中的作用。以Con A为配基的亲和层析介质广泛用于糖蛋白的分离纯化和多糖、糖蛋白糖链结构的研究。
稳定性
由酸硷稳定性试验可知，在极端pH 值条件下，ConA产生不可逆变性，活力丧失。因此，在今后进行刀豆凝集素的灭活方面研究时，可採用稀硷溶液浸提，并控制一定的pH值，从而灭活大部分的ConA活力。