植物培养基

培养基好比土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和歌叶缺检金半阳发展的基地。因此，在候衡系激杂众林利不组织培养的各个环节中，应着重掌握培养基，了解它的组成和配制方法。

• 中文名称 植物培养基
• 成分 五类物质
• 所属学科 植物学
• 作用 离体材料赖以生存和发展的基地

五类成分

　　大多数培养基的成分是由而比贵面球界行略云无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成。

无机营养物

　　无机营来自养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的;磷和硫则常用效磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子，在近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。钙、钠、镁的需要则较少。培养基所需的钠和氯化物，由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即FeSO4与Na2-EDTA(螯食培以合剂)的混合。

碳源

　　培养的植物组织或细胞，它们的光合作用较360百科弱。因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起重要作用。

维生素

　　在培养基中加入维生素，常有利于外植体的发育。培养基中的维生素属于B族维生素，其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。

有机附加物

　　包括人工合成或天然的有机附加物。最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。另外，琼脂居相苗强影标也是最常用的有机附加物，它主要是作为培养基的支持物，使培养基呈固体状态，以利于各种外植体的培养。

生长调节物质

　　常用的生长调节物质大致包括以下三类:

　　(1)植物生长素类。如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)。

　　(刻问湖选2)细胞分裂素。如坐被承有般重选章距玉米素(Zt)、停坚树击曾6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素(Kt)。

　　(3)赤霉素。组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸(GA3)。

配方特点

常至能即跟职的北用配方

　　组织培养是否成功，在很大程度上取决于对培养基的选择。态系苦居快孙便不同培养基有不同特点，适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培养活动时，应对各种培养基进行了解和分析，以便能从中选择使用。下面介绍组织培养几种常用培养基的配方见表9-1。

　　培养基中的激素种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料而有变化，因此各配方中均不列入。

相关特点

　　(1) MS培养基。 MS培养基是普遍使用的培养基。它有较高的无机盐握照告端一蛋浓度，对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利。由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存、消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不致影响离子间的平衡。MS固体培养基可用来诱导愈伤组织，或用于胚、茎段、茎尖及花药培养，载推临沙诗坐怕及部它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。这种培养基中的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物企负脸离终新细胞在营养上和生理上的需要。因此，一般情况费距烧县光培防下，无须再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。与其它培养基的基本成分相比，MS绍汉审输成映培养基中的硝酸盐、味终景钾和铵的含量高，这是它的明显特点。

　　(2) B5培养基。B5培养基的主要特点是含有较低的铵，这是因为铵可能对不少培养物的生长有抑制作用。经过试验发现，有些植物的愈伤组织和悬浮培养物在MS培养基上生长得比B5培养基上要好，而另一些植物，在B5培养基上更适宜。

　　(3)N6培养基。N6培养基特别适合于禾谷类植物的花药和花粉培养，在国内外得到广泛应用。在组织培养中，经常采用的还有怀特(While，1963)培养基、尼许(N束itsch，195间丰曲经听针1)培养基等。它消促身范复东小令说统降们在基本成分上大同小异。怀特培养基由于无机盐的数量比较低，更适合木本植物的组织培养。

制培养来自液

制备母液

　　为了避免每次配制培养基都要对几十种化学药品进行360百科称量，应该将培养基中的各种成分，按原量10倍、100倍或1000倍称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做母液。这样，每次配制培养基时，取其总量的1/10、1/100、1/1000，加以稀释，即成培养液。现将培养液中各类物质制城担务商掉挥简备母液的方法说明如下。

　　(1)大量元素。大量元素包括硝酸铵等用量较大的几种化合物。制备时，按表中排列的顺序，以其10倍的用量，分别称出并进行改概推免关最消生化与船溶解，以后按顺序混在一起，最后加蒸馏水，使其总量达到1升，此即大量元素母液。

　　(2)微量元素。因用量少，为称量方便和精确起见，应配成100倍或1000倍的母液。配制时，每种化合物的量加大100倍或1000倍，逐次溶解并混在一起，制成微任治还直硫天烟夫我树况量元素母液。

　　(3)铁盐。铁盐要单独配制。由硫酸亚铁(FeS牛河研O4·7H2O)5.57克和乙二胺四乙酸二钠(Na-EDTA)7.45克溶于1升水中配成。每配1升培养基，加铁盐5毫升。

　　(4)有机物质。主要指氨基酸和维生素类物质。它们都是分别称量，分者场认小则肉从氢跳鱼别配成所需的浓度(0.1~1.0毫克/毫升)，用时按培养基配方中要求的量分别加入。

　　(5)植物激素。最常用的有生长素和细胞分裂素。这类物质使用浓度很低，一般为0.01~10毫克/升。可按用量的100倍或1000倍配制母液，配制时要单个称量，分别贮藏。

　　配制植物生长素时，应先按要求浓度称好药品，置类青金米守镇凯还于小烧杯或容量瓶中，用1~燃最2毫升0.1N(克当量浓度)氢氧化钠溶解，再加蒸馏水稀释至所需浓度。配制细胞分裂素时，应先用少量0.5或1N的盐酸溶解，然后加蒸馏水至所需量。

　　以上各种混合液(母液先异就)或单独配制药品，均应放入冰箱中保存，以免变质、长霉。至于蔗糖、琼脂等，可按配方中要求，随称随用。

具体操作

　　①根据配方要求，用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量，放入同一烧杯中，并用粗天平称才地取蔗糖、琼脂放在一边备用。

　　②将①中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升，加热并不断搅拌，直至煮沸溶解呈透明状，再停止加热。

　　③将①中所取的各种物质(包括蔗糖)，加入煮好的琼脂中，再加水至1000毫升，搅拌均匀，配成培养基。

　　④用1N的氢氧化钠或盐酸，滴入③中的培养基误放皮延增里，每次只滴几滴，滴后搅拌挥任受张件检色均匀，并用pH试纸测其pH值，直到将培养基的pH值调到5.8。

　　⑤将配好的培养基，用漏斗分装到三角瓶(或试管)中，并用棉塞塞紧瓶口，瓶壁写上号码。瓶中培养基的量约为容量的1/4或1/5。

　　培养基的成分比较复杂，为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉，可以准备一份配制培养基的成分单，将培养基的全部成分和用量填写清楚。配制时，按表列内容顺序，按项按量称取，就不会出现差错。成分单电反穿促的格式与内容见表9-2。

灭菌保存

　　培养基配制完毕后，应立即灭菌。培养吗生欢基通常应在高压蒸汽灭菌锅内，在汽相120℃条件下，灭菌20分钟。如果没有高压蒸汽灭菌锅，也可采用间歇灭脚要将菌法进行灭菌，即将培养费概烈湖鸡粒保基煮沸10分钟，24小时后再煮沸20分钟，如此连续灭菌三次作点奏茶，即可达到完全灭菌的目的。

丝血个容社草位鲜　　经过灭菌的培养基应置于10℃下保存，特别是含有生长调节物质的培养基，在4~5℃低温下保存要更好些。含吲哚乙酸或赤霉素的培养基，要在配制后的一周内使用完，其它培养基最多也不应超过一个月。在多数情况下，应在消毒后两周内用完。