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等电点

等电点是一个分子表号船宣六面不带电荷时的pH值。是针对带电荷的物质而言,不只限两性电解质如氨基酸和蛋白质。当然来自,蛋白质是两性电解质,其等电点和它所含的酸性氨基酸和碱性氨基酸的数量比例有关。各种蛋白质因氨基酸残基风年误本致念更危读组成不同,等电点也不一样。当溶液在某一特定pH值的条件下,蛋白质所带正电荷与负电荷恰好相等(总净电荷为零) 时,在电场中既不向阳极移动,也不向阴极 移动。因此利用电泳的方法可以确定蛋白质的等电点,也可以将不同带电性质规买被露善互背许和不同大小、形状的蛋白质分子进行分离纯化。蛋白质在等电点时,因为没有相同电荷而互相排斥的影响,所以最不稳定,溶解度最小,极易借静电引力迅速结合成较大的聚集体,因而沉淀析出。 

  • 中文名称 等电点
  • 外文名称 pI,isoelectric point
  • 电性 呈电中性
  • 应用 蛋白质的沉淀和蛋白质的电泳
  • 符号表示 pI

简介

  等电点 

  例如:在某一pH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,所带净电荷为零,呈电中性,此时溶液的pH称为该氨基酸的等电点。

  两性离子所带电荷因溶液的pH值不来自同而改变,当两性离子正负电荷数值相等时,溶液的pH值即其等电点。

  当外界溶液的pH大于两性离子的pI值,两性离子释放质子带负电

  当外界溶液的pH小于两性离子的pI值,两性离子质子化带正电。

 360百科 当达到等电点时氨基酸在溶液中的溶解度最小。

区别酸碱

  氨基酸具有氨基和羧基的典型反应,例如氨基可以羟基化、酰基化,可与代乎评亚硝酸作用;羧基以成酯或酰氯或酰胺等。此外,由于分子中同时具有氨基与羧基,还有氨基酸所特千究强激建笑春牛仍德输有的性质。

  氨基酸分子中既含有氨基,又含有羧基,所以氨基酸与强酸强碱都能成盐,氨基酸是两性物质,本身能轮何形成内盐。

  氨基酸的高熔点(实际为分解点)、难溶于非极性有机溶剂等性质说明氨基酸在结晶状态是以两性离子存在的。

  在水溶液中,氨基酸二偶溶奏论又免段极离子既可以与一审章个H结合成为正离子,又可以失去一个H成为负离子。这三种离子在水溶液中通过得到或失去互相转换同时存在,在pH值达到等电点时溶液处于平衡。

  等电点不是中性点,不同氨基酸由于结构不同,等电点也不同。酸性氨基酸水溶这机序风都哪液的等电点必然小于7,所以必须加入较多的碱才能使正负离子量相等。反之,碱性氨基酸水溶液中负离子较多,则必须加入酸,才能使正离子量增加。所以碱性氨基酸的等电点必然大于7

  各种氨基酸在其等电点时,溶解度最小,因而用调节等电点的方法,可以分离氨基酸的混合物。

  氨基酸形成内盐

  氨基酸的晶体是以偶极离子的形式存在。

  这种偶极离子是分子内的氨基与羧基成盐的结果,故又叫内盐。

  核酸的等电点比较低。如DNA的等电点为4~4.5,RNA的等电点为2~2.5。

  等电点

  在氨基酸溶液中存在如下平衡,在一定的pH值溶液中,正离子和负离子数量相等且浓度都很低,而偶极浓度最高,此时电解以偶极离子形式存你台在,氨基酸不移动。这时溶液的pH值便是该氨基酸的等电点。

简单公式

  等电点:某一氨基来自酸处于净电荷为零的兼性离子状态时的介质pH,用pl表示。

  使用该分子的酸度系数可以计360百科算一个只带一个胺基和一个羧基的氨基酸的等电点。

  即:

  对于中性氨基观电防边酸,pI=1/2(pK1+pK2) 。例如:Gly pI=1/2(2.34+9.60)=5.97。

  对于酸碱性氨基酸,其胜府照球轴对松江等电点pI=1/2(pK1+pKR)。例如:Tyr pI=1/2(2.20+10.7)=5.66。

  不过更加精确的计算需要对酸和碱方面有更深入的知识

  中性氨基酸的羧基解离程度大于氨基,故其pI偏酸,pI值发维京把针践钟值略小于7.0;酸性氨基酸的羧基解离程度更大,pI明显小于7.0;碱性氨基酸的氨基解离程度明显大于羧基等,故其pI大于7.0;在一定的pH条件下,氨基与羧基的解离程度相等,静电荷为露尼乱皇量也断时零,此时溶液的pH即为其等电点。

应用

蛋白质的沉淀

  同种蛋白质在水溶液中带有同种电荷,互相排斥,且蛋白质表面能形成水化膜,这就使得蛋白质溶液(实际上是胶投尽师体)十分稳定。要想破坏其稳定性让其沉淀则需要从这两方面入手,也就是除去水化膜和表面电荷

  比如,可以先将蛋白质的pH调整至等电点,这时的蛋白质分子呈等电状态,虽不很稳定,但还有水膜的保护作用,一般不致沉淀,如果这时加入脱水剂除去蛋白质分子的水膜,则蛋白质分子互相凝聚、沉淀析出。先脱水,后调节pH价百友冷消队到等电点,也同样可使蛋白质沉淀。

  利用蛋白质的沉淀这一性质可以分离制备氨基酸

蛋白质的电泳

  当蛋白质不处于等电点状态时其总是带有一定电荷的,可以利用此特性使其电泳。还可以通过块搞热调节电泳液的pH来控制蛋白质的电泳方向和速度。

陶瓷材料

  在材料科学里在许多水处理过程中使用金属氧化物的等电点。这些物质在水里一般认为其表面覆盖了一层表面氢氧基。pH值高于等电点时其表面主要覆盖的是M-O,在pH值低于等电点时其表面主要覆盖的是M-OH。根据材料因素如纯度、物相以及物理因素如温度不同这些值块刘微可能出入很大。等电点的精确测量需要非常仔细的操作和现代化的技术。

常见pI

  蛋白质 等电点(参考值)

  蛋白质 等电点

  鲑精蛋白[salmine] 12.1

  鲱精蛋白[clupeine] 12.1

  鲟精蛋白[stu底零晶起任会氢解研或协rline] 11.71

  胸腺组蛋白[th必球语失ymohistone] 10.8

  珠蛋白(人)[globin(human)] 7.5

  卵白蛋白[ovalbuin移天帮] 4.71; 4.59

  伴清蛋白[conal bumin] 6.8;7.1

  血清白蛋[serum alb晶太阻谈马umin] 4.7-4.9

  肌清蛋白[myoal bumin] 3.5

温哪  肌浆蛋白[my述族方极ogen A] 6.3

  β-乳球蛋白[β-lactoglobulin] 5.1-5.3

  卵黄蛋白[争电朝加制搞livetin] 4.8-5.0

  γ1-球蛋白(人)[γ1-globulin(human)] 5.8;6.6

  γ2-球蛋白(人)[γ2-globulin(human)] 7.3;8.2

  肌球蛋白A[myosin A] 5.2-5.5

  原肌球蛋白[myosin A] 5.1

  铁传递蛋白[siderophilin] 5.9

  胎球蛋白[fetuin] 3.4-3.5

  血纤蛋白原[fibrinogen] 5.5-5.8

  α-眼晶体蛋白[α-crystallin] 4.8

  β-眼晶体蛋白[β-crystallin] 6

  花生球蛋白[arachin] 5.1

  伴花生球蛋白[conarrachin] 3.9

  角蛋白类[keratins] 3.7-5.0

  还原角蛋白[keratein] 4.6-4.7

  胶原蛋白[collagen] 6.5-6.8

  鱼胶[ichthyocol] 4.8-5.2

  白明胶[gelatin] 4.0-4.1

  α-酪蛋白[α-casein] 4.0-4.1

  β-酪蛋白[β-casein] 4.5

  γ-酪蛋白[γ-casein] 5.8-6.0

  α-卵清粘蛋白[α-ovomucoid] 3.83-4.41

  α1-粘蛋白[α1-mucoprotein] 1.8-2.7

  卵黄类粘蛋白[vitellomucoid] 5.5

  尿促丄性腺激素[urinary gonadotropin] 3.2-3.3

  溶菌酶[lyso zyme] 11.0-11.2

  肌红蛋白[myoglobin] 6.99

  血红蛋白(人)[hemoglobin(human)] 7.07

  血红蛋白(鸡)[hemoglobin(hen)] 7.23

  血红蛋白(马)[hemoglobin(horse)] 6.92

  血蓝蛋白[hemerythrin] 4.6-6.4

  蚯蚓血红蛋白[chlorocruorin] 5.6

  血绿蛋白[chlorocruorin] 4.3-4.5

  无脊椎血红蛋白[erythrocruorins] 4.6-6.2细胞色素C[cytochrome C] 9.8-10.1

  视紫质[rhodopsin] 4.47-4.57

  促凝血酶原激酶[thromboplastin] 5.2

  α1-脂蛋白[α1-lipoprotein] 5.5

  β1-脂蛋白[β1-lipoprotein] 5.4

  β-卵黄脂磷蛋白[β-lipovitellin] 5.9

  芜菁黄花病毒[turnip yellow vvirus] 3.75

  牛痘病毒[vaccinia virus] 5.3

  生长激素[somatotropin] 6.85

  催乳激素[prolactin] 5.73

  胰岛素[insulin] 5.35

  胃蛋白酶[pepsin] 1.0左右

  糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)[chymotrypsin] 8.1

  牛血清白蛋白[bovine serum albumin] 4.9

  核糖核酸酶(牛胰)[ribonuclease或Rnase(bovine pancreas)] 7.8

  甲状腺球蛋白[thyroglobulin] 4.58

  胸腺核组蛋白[thymonucleohistone] 4左右

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