植物基因工程实验手册

《来自植物基因工程实验手册》关度是清华大学出版社出版的一本图书。360百科作者是何光源。本书介绍了植物基因工程中片件直刘钟毫革常用的实验方法和技术。

• 中文名 植物基因工程实验手册
• 出版社 清华大学出版社
• 作者 何光源
• ISBN 9787302141594

基本信息

　　作 来自者:何光源编

　　丛 书 名:植物基因工程实验手册

　　出 版 社:清华大学危地核希担验急振频出版社

　　ISBN:9787302141594

360百科　　出版时间:2007-04-01

　　版 次:1

　　页 数:156

　　装 帧:平装

　　开 本:

　　所属分类:图书 > 科学与自速初然 > 生物科学

内容简介

　　再镇片任《植物基因工程实验手册》全书共分6章，详细阐述了目的基因的分离、载体构建、目的基因的转化、转基因植物鉴定、转基因植物的基因安全评价、计算机在植物基因工程甚切温科起牛研究中的应用等内容。本末还附有植物基因工程实验中常用溶液、缓冲液和培养基的配制，常用抗生本此修春案示投素及使用浓度，凝胶浓度的有效分离范围和常用的分子质量标准以及核酸的量与质量间的换算等资料数据。

目录

　　第1章 目的基因的分离

　　1.1植来自物组织DNA的提取1

　　1.1.1植物组织总DNA的提取2

　　1.1.2植物细胞核DNA的提取6

　　1.1.3植物细采医普亚触胞叶绿体DNA的提取7

　　1.1.4植物细胞360百科线粒体DNA的提取10

　　1.2植物组织RNA的提取12

　　1.2.1植物组织总RNA的提取12

　　1.2.2mRNA的分离燃合纯化14

　　1.3目南够注牛装元班目规厂的基因的PCR扩增18

　　1.3.1mRNA差别显示技术家脱意善独群克助年19

　　1.3.2抑制性扣除杂交技术23

　　1.3.3保守序列PCR克隆技术27

　　参考文献29

　　第2章 载体构建

　　2.1扩增体系建立31

　　2.1.1大肠杆菌质粒DNA的提取31

　　2.1.2DNA的限制性内切酶消化34

苦　　2.1.3DNA片段的纯化其石型率回收35

　　2.1属话妈合好.4目的基因与载体的连接露消裂非更他项难革37

　　2.1.5重组质粒DNA转化大肠杆菌39

　　2.1.6重组质粒细胞菌落的鉴定43

　　2.2植物遗传转化载体构建44

　　2.2.1根癌农杆菌Ti质粒DNA的提取44

　　2.2.2Ti质粒转化载体的构建46

　　2.2.3发女乎宪损于然子氧减它根农杆菌Ri质粒DN沙妒贵验A的提取47

　　2.3组织特异性表达载体的构建48

　　2.3.1组织特异性启动子与质源粒DNA的酶切及回收48

　　2.3.2组织特异性启动子与载体DNA片段的连接50

　　参考文献50

　　第3章 目的基因的转化

　　3.1农杆菌转化法51

　　3.1.1烟草农杆菌叶盘转化52

　　3.1技义民盾激般方酒孩承.2拟南芥花序浸润转化55

　　3.1.3水稻愈伤组织农杆菌转化56

　　3.1.4发根农杆菌转化58

　　3.2基因枪转化法59

　　春苗飞引倒剂观3.2.1小麦幼胚基因枪转化60

　　3.2.2叶...

　　3.2.2叶绿体遗传转化62

　　3.3电穿孔法66

　　3.4PEG介导的基因转化法68

　　参考文献71

　　第4章转基因植物的鉴定

　　4.1标记基因的断检测73

　　4.1.1gus基因检测74

　　4.1.2bar基因的检测80

　　4.1.3GFP的检测83

　　4.2目的基因的整合鉴定83

　　4.2.1Southe弦座盟rn印迹杂交83

　短流践感准参合破　4.2.2RTPCR96

　　4.2.3Northern杂交98

　　4.2.4荧光原位杂交(FISH)107

　　4.3基因的表达分析112

　　4.3.1居用概顾脚太定吧将胜后SDSPAGE分析112

　　4.3.2W吃留杀航弦输除倍家estern印迹114

　　参考文献116

　　第5章转基因植物的基因安全评价

　　5.1转基因小麦环境释放中花粉介导的基因漂移检测117

　　5.2土壤微生物群落的检测120

　　5.3转基因食品的毒理学评价122

　　5.3.1急性毒性试验123

　　5.3.2微核实验124

　　5.3.330天和90天喂养试验125

　　5.3.4慢性毒性和致癌试验127

　　参考文献128

　　第6章计算机在植物基因工程研究中的应用

　　6.1生物学相关软件131

　　6.1.1Primer131

　　6.1.2RasMol2.6135

　　6.1.3DNAStar137

　　6.1.4进化树的软件139

　　6.2生物学实用网站142

　　参考文献144

　　附录

　　附录1主要溶液(母液)及缓冲液的配制145

　　附录2常用培养基的配制150

　　附录3常用抗生素的配制及使用浓度152

　　附录4凝胶浓度的有效分离范围152

　　附录5常用的相对分子质量标准153

　　附录6核酸的量与质量间的换算156